ПЦР диагностика на гепатит: что это такое

ПЦР-анализ отличается высокой чувствительностью: возбудителя гепатита можно обнаружить по одной молекуле на коже или в биологической жидкости человека.

Особенности ПЦР-диагностики гепатита

В лаборатории диагностика проводится посредством размножения частицы вируса в пробирке (in vitro) в определенной среде, при этом значительную роль играют специальные ферментативные вещества. От точности диагностики зависит эффективность терапии, так как штаммы вируса по-разному реагируют на противовирусные препараты.

Анализы на гепатит методом ПЦР проводятся двумя способами – количественным и качественным.

Качественное и количественное исследование

1. Цель проведения качественного исследования – выявить возбудителя заболевания и определить его генотип. Этот метод необходим для правильной диагностики и дальнейшего прогноза течения болезни, а также для правильного выбора тактики лечения.
2. Если качественный анализ выявил в крови вирус гепатита, нужно провести количественное исследование. Оно выявляет концентрацию молекул РНК возбудителя в той или иной биологической жидкости больного.

Подготовка к ПЦР-диагностике гепатита

Для проведения лабораторных анализов нужно сдать кровь утром натощак. Правила подготовки к сдаче ПЦР0анализа на гепатит С:

• Последний раз примите пищу за 10 часов до исследования, однако пить чистую воду можно. Исключите алкоголь за день до анализа, сигареты – за 4 часа до начала процедуры.
• Избегайте эмоциональных потрясений и физических нагрузок непосредственно перед исследованием.
• Прекратите прием лекарственных препаратов за 2 дня до проведения ПЦР на гепатит С. При невыполнении этого условия необходимо уведомить лаборанта, т.к. прием ряда лекарственных препаратов может привести к ложноположительному результату процедуры.

ПЦР на гепатит С

Положительный результат ПЦР-анализа на гепатит С подтверждает повреждение гепатоцитов и размножение вируса. Количественное ПЦР-исследование измеряется в МЕ/мл или копиях/мл. Полученные данные позволяют выявить количество копий РНК возбудителя гепатита С в 1 мл крови.

Показатели анализа зависят от уровня вирусной нагрузки. У человека, не страдающего гепатитом С, результат ПЦР-теста будет отрицательным. Это означает, что возбудитель не выявлен в крови исследуемого.

Оценка данных количественного исследования на гепатит С методом ПЦР представлена в таблице.

Данные количественного исследования интерпретируются следующим образом:

1. Правильная терапия и благоприятный прогноз лечения – низкая вирусная нагрузка.
2. Острое течение болезни – высокая концентрация возбудителя. Пациент заразен для окружающих.
3. Хронический гепатит — средние показатели вирусной нагрузки, которая может как увеличиваться, так и уменьшаться.

Больные гепатитом С проходят количественные исследования с периодичностью 1, 3 и 6 месяцев. Контрольная ПЦР-диагностика проводится по окончании лечения.

ПЦР на гепатит B

Цель проведения ПЦР-теста на гепатит B – выявление ДНК возбудителя. Мера подсчета – копии/мл или МЕ/мл, значение которых интерпретируется следующим образом:

• < 2х10 – болезнь завершится на острой стадии и не перейдет в хроническую.
• 2х104 до 2х106 – в 30% случаев болезнь переходит в хроническую.
• 2х106 – в 95% случаев следующим этапом станет хроническая стадия.

Расшифровка ПЦР диагностики

Результат качественного исследования может быть как отрицательным, так и положительным. Положительный результат – это подтверждение выявления РНК возбудителя определенного штамма. Отрицательный анализ подразумевает, что в крови отсутствует вирус гепатита.

ПЦР-исследование имеет стопроцентную диагностическую точность, однако на практике его достоверность составляет 95%. Причина неверного результата оставшихся 5% – халатность персонала. Чтобы избежать ошибки, при выполнении исследования нужно соблюдать такие правила:

• обеспечивать чистоту исследуемого материала;
• поддерживать необходимые условия хранения реактивов.

Кроме того, забор крови для анализа должны проводить высококвалифицированные медработники.

Результат количественного ПЦР-исследования на гепатит – оценка вирусной нагрузки на организм. Этот вид диагностики позволяет:

• уточнить стадию болезни;
• выявить эффективность противовирусной терапии;
• в ряде случаев определить необходимость проведения биопсии печени.

На ранней стадии болезни или, наоборот, при наличии хронической формы инфицирование выявляется только посредством ПЦР-анализа, пациент при этом не жалуется на плохое самочувствие. Дальнейшее лечение возможно после проведения дополнительного обследования и назначения противовирусной терапии.

Цена качественного ПЦР-анализа в Москве и Санкт-Петербурге составляет от 600 до 900 рублей, в регионах такое исследование обойдется от 300 до 800 рублей. Стоимость количественного исследования на гепатит С варьируется в пределах 17000-22000 рублей, на гепатит В — от 1200 до 10000 рублей.

Преимущества и недостатки исследования

К преимуществам ПЦР-диагностики относятся:

• Скорость проведения исследования. Получить результаты качественного анализа можно через несколько часов, количественного – через пару суток.
• Возможность определить возбудителя в инкубационном периоде. Метод ПЦР выявляет вирус гепатита С до развития патологической реакции, а не тогда, когда уже сформирован иммунный ответ. Это позволяет начать адекватное лечение как можно раньше.
• Точность обнаружения вируса. Применение различных сочетаний ферментов и высокий уровень проведения лабораторных тестов позволяют получить стопроцентную точность результатов анализа.
• Высокий уровень чувствительности. Даже наличие одной молекулы возбудителя позволяет обнаружить инфицирование.
• Возможность выявить вирус любой этиологии.

Недостатки ПЦР-диагностики напрямую связаны с ее преимуществами:

1. Для достоверности анализа необходима высокая степень чистоты, чтобы другие РНК не проникли в образец. Это требование относится и к воздуху в лаборатории.
2. Важным аспектом получения правильного результата является уровень квалификации медперсонала. Если лаборант не обладает необходимыми навыками и умениями для проведения исследования, анализ будет неинформативным.

Специалист, который занимается расшифровкой результатов исследования, должен уметь отличать ложноположительный анализ от подлинного. Первый зачастую диагностируется при наличии в крови нежизнеспособного возбудителя после завершения терапии. Также встречаются ложноотрицательные анализы, когда возбудитель не обнаружен даже при наличии клинической картины.

© 2019 — 2021, Игнатова Татьяна Михайловна. Все права защищены.